产品别名 |
SHP-77,人小细胞肺癌细胞 |
面向地区 |
全国 |
一、细胞简介：
细胞名称：SHP-77人小细胞肺癌细胞
平台编号:zl-050692
SHP-77保留了SCLC的重要特征，具有稳定的生物化学特性，可以连续培养。该细胞系是小细胞肺癌中一种不常见的未分化大细胞突变体。它虽然具有突变体的形态，但保持了经典SCLC的生化特性。电子显微镜观察发现存在腺体形成和胞浆内板层体(intracytoplasmiclamellarbodies)。
SHP-77可用做检测51Cr和111In释放对体外细胞及裸鼠体内毒性的靶标，用于评估肺癌患者的细胞和血清的反应水平。该细胞可用于评估接受放射或化学疗法的SCLC患者的状况。经本库STR检测无误。
STR鉴定结果为：Amelogenin:X,X；CSF1PO:10,11；D13S317:8,8；D16S539:11,11；D5S818:12,12；D7S820:11,11；TH01:7,7；TPOX:9,11；vWA:16,16。
细胞特性
1）来源：54岁男性肺;小细胞肺癌
2）形态：悬浮和松散贴壁
3）含量：>1x106细胞数
4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5）用途：仅供科研使用。
二．细胞的培养步骤：
1）准备RPMI-1640培养基87%
胎牛血清10%
GlutaMAX-1guanxianan1%
SodiumPyruvatebingtong酸钠1%
P/Sqingmei素-lianmei素1%
注意:该细胞参考传代周期：4-6天,参考换液频率：每2-3天换1次液,传代时可以轻轻拍打细胞培养瓶侧面十余次，将悬浮的细胞进行收集离心，以40万~50万/mL的密度重悬传代。轻轻拍打后显微镜下观察仍贴壁未悬浮的细胞量多的话可以继续拍打重复收集，细胞量很少的则丢弃，不收集传代。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
三．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达70%-90%，即可进行传代培养。
该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞，传代可以参考以下方法：
1.收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。
2.加入0.25％（w/v）yidanbaimei-0.53mMEDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
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