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测定意义:
植物叶绿素广泛存在于绿色植物组织中,其含量与光合作用、营养状况密切相关,是反应植物生长状况的重要指标。
注 意:
正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定原理:
叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处有大吸收,根据经验公式可计算得叶绿素a和叶绿素b以及总叶绿素含量。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、10mL玻璃试管、锡箔纸、丙酮。
植物叶绿素含量试剂盒
测定操作:
1.称取约新鲜植物叶片或其它绿色组织,去掉中脉,称取约0.1g,剪碎,用蒸馏水洗干净。
2.提取液的准备:取240mL蒸馏水和960mL丙酮,充分混匀待用。
3.加入1mL蒸馏水,少量试剂一(约50mg),在黑暗或弱光条件下充分研磨,转入10mL玻璃试管。
4.用提取液冲洗研钵,将所有冲洗液转入玻璃试管,用提取液补充至10mL,玻璃试管置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提3h,观察试管底部组织残渣完全变白则提取完全,若组织残渣未完全变白,继续浸提至其完全变白。
5.取浸提液200μL于微量石英比色皿/96孔板,提取液调零,测定663nm和645nm处吸光值,分别记为A663和A645 。
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