关键词 |
叉头框蛋白04,TGF-β诱导早期基因1,心纳素,解整合素样金属蛋白酶10 |
面向地区 |
全国 |
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60 ng/L5 号标准品150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
30 ng/L4 号标准品150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
15 ng/L3 号标准品150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
7.5 ng/L2 号标准品150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
3.75 ng/L1 号标准品150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,
然后再加待测样品 10µl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中类重组ph20(spam1)水平。用纯化的类重组ph20(spam1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入类重组ph20(spam1),再与HRP 标记的类重组ph20(spam1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的类重组ph20(spam1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人类重组ph20(spam1)浓度。
试剂盒组成:
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液 6ml×1 瓶
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶
7 终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份
11 封板膜 2 张; 12 密封袋 1 个
标本要求
1. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2. 不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)活性。
elisa试剂盒价格具有以下优点:
1)快速: 仅需传统夹心法ELISA 1/3的操作时间,1小时即可完成整个试验流程;
2)简单: 只需1个洗涤步骤;
3)灵活: 可单或同时检测总蛋白及磷酸化蛋白,可在同一板上检测不同的靶蛋白;
4)灵敏: 达到甚至超过行业标准,且结果一致性良好;
5)兼容: 常规比色法检测,实验室常规酶标仪读数;
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