关键词 |
植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶,微生物碱性磷酸酶,猪单核细胞趋化蛋白-1,猪链球菌2型抗体 |
面向地区 |
全国 |
Elisa试剂盒注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
ELISA试剂盒保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,一般均选用水浴,可将ELISA试剂盒板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度敏捷平衡。为防止蒸腾,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反响板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA试剂盒应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的资料如金属等,在盒底垫湿的纱布,后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规则的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。
为什么ELISA反响总是需求一定时刻的温育?
ELISA属固相测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生,以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其间的抗原并不是都有平等的和固相抗结合的时机,只有贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触,这是一个逐步平衡的进程,因而需经扩散才能到达反响的结尾。在这以后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。
温育常选用的温度有43℃、37℃、室温和4℃等。
37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的适宜温度,在建立ELISA方法作反响动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反响一般在37℃经1~2小时,产品的生成可达高峰。为加快反响,可进步反响的温度,有些实验在43℃进行,但不宜选用更高的温度。抗原抗体反响4℃更为,在放射测定中多使反响在冰箱中过夜,以构成多的沉淀。但因所需时刻太长,在ELISA试剂盒中一般不予选用。
ELISA试剂盒实验、检测法操作总结
对于ELISA试剂盒实验操作,一些老师可谓是得心顺手,操作起来很流畅,但对于一些实验新手,大概只是背熟了理论概况,在实践上,还是缺乏经验,不知从何下手,今日,BUNSEN本生为帮助大家更好更顺利的完成实验,特对ELISA试剂盒实验操作经验进行了总结,一起来看看吧:
1. elisa实验中每一个步骤都要认真对待,省去任何一个步骤或者不认真对待都可能导致elisa实验的失败
2. tip头吸完后马上从移液器上取下来,以免忙乱的时候又以同一tip汲取另一种试剂
3. elisa实验开始前认真做个实验计划,做实验时要专心致志,不要三心二意操作,必要时候进行记录以便后期寻找出错原因,在有部分实验数据出来时。
4. 每次elisa实验结束,也要及时做好实验报告
5. 在加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间过长浓度不均对实验结果造成影响
6. elisa实验结束后整理实验台,养成良好习惯
7. 做实验一定要有计划,这个不是为了出文章
8. elisa实验经验分享实验过程中要详细记录实验数据
9. 所有的东西都要标记好日期药品名称浓度等
10. 移液枪用完之后要归到大计量的位置,防止时间导致弹簧失去弹性
11. 不使用酶标枪时不建议一直拿在手里,特别是里面还有液体的时候不可以倒过来
12. 做完实验需洗手,离开实验室前或进入实验室前注意水,电是否安全
13. elisa试验开始之前需查阅资料的时候,如若记要表明出处,方便日后查找
14. 一定要记着关水浴箱
15. 很多实验室的枪头是回收的
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产品涵盖有荧光定量PCR耗材(八联管,单管,96孔板,384孔板,封板膜,辅助器等),ELISA试剂盒,移液器吸嘴,离心管,冻存管,培养皿,培养板,培养瓶,吸头,仪器及手套,培养基,抗体,血清,色谱耗材,针头过滤器及实验室常用耗材。 品种类超过万种,广泛应用于科研院校、中心实验室、分子生物学等科研域。
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