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游离脂肪酸含量试剂盒,游离脂肪酸检测试剂盒 |
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游离脂肪酸含量试剂盒
测定意义:
游离脂肪酸,也称为非酯化脂肪酸,在与白蛋白结合的血浆中循环。动物血液中的游离脂肪酸 (FFA )含量是一项重要的生理生化指标。血清中游离脂肪酸的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关,游离脂肪酸的浓度会因为糖尿病、重症肝障碍、甲状腺功能亢进等疾病而上升。
测定原理:
用有机溶剂萃取FFA。含有FFA的有机液与三铜反应,在有机相中形成脂肪酸铜 (铜皂) FFA一Cu。Cu离子与显色液反应形成紫红色络合物。反应形成的颜色深浅与Cu离子浓度的关系符合朗伯一比尔定律,因此可利用此反应进行比色。
注 意:
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
样本前处理:
1.动物组织:按照动物组织质量(g):萃取液mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL萃取液),进行冰浴匀浆。震荡提取15min,5000 rpm 4℃离心5min,取有机相待测。
2.血清:吸取50 μL血清样本,加入1 mL萃取液,震荡提取15 min后,4℃,5000 rpm离心5 min,取有机相待测。
3.微生物、细胞:按照细胞数量(104个):萃取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1 mL萃取液)加入萃取液,冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声2秒,间隔3秒,总时间3min);震荡提取15 min,然后5000 rpm 4℃离心5min,取有机相待测。
注意:有机相待测液可能存在于上层,也可能存在于下层,注意观察,体积较多的那一层即为有机相待测液。
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