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果糖16二磷酸测试盒
测定意义:
果糖1,6-二磷酸是机体内的高能代谢物和代谢调控剂,是糖酵解途径的重要中间体,广泛存在于动植物和微生物体内,能影响细胞内钾离子的浓度,改善葡萄糖和其他能量底物的代谢,促进组织氧的释放,广泛应用于临床医药制剂。
测定原理:
醛缩酶催化果糖1,6-二磷酸降解,产物与DNPH缩合成紫红色物质,在540nm有特征吸收峰。
注 意:
正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
样品处理:
1.组织:按照质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL试剂一)加入试剂一,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清待测。
2.细胞:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃,10000g离心10min,取上清待测。
3.液体:直接检测。
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