钙结合蛋白试剂盒

ELISA试剂盒 注意事项：
1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2、浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3、各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4、请每次测定的同时做标准曲线，好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔孔的 OD 值） ，请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5） 。
5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6、底物请避光保存。
7、严格按照说明书的操作进行，试验结果判定以酶标仪读数为准.
8、所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9、本试剂不同批号组分不得混用。
10、如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

ELISA试剂盒组成：
试剂盒组成48 孔配置96 孔配置保存
说明书1 份1 份
封板膜2 片(48)2 片(96)
密封袋1 个1 个
酶标包被板1×481×962-8℃保存
标准品：540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
标准品稀释液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶标试剂3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
样品稀释液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
显色剂 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
显色剂 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
终止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
浓缩洗涤液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存

影响ELISA试剂盒实验的因素
一、试剂盒
1、抗原、抗体活性对效价的影响：主要是试剂中抗体(或抗原)的效价降低或失活，结果不易判断。再有ELISA法灵敏度高，对杂质的反应灵敏度也高，实验中空白对照OD值偏高或假阳性;
2、酶结合物浓度过高，也会导致OD值假性增高。
二、试验仪器
1、ELISA试剂盒加样器是否经过校正，酶免测定血清用血量很少，如手工加样器的性能不好，吸取样品不，会使结果忽高忽低;
2、每次洗板前，应检查洗板机针孔有无堵塞。
三、操作
1、检测前先将试剂盒从冰箱取出置室温平衡20min后使用，试剂用完及时放回冰箱冷藏，以免造成试验结果假性降低;
2、加样时注意勿触及包被板底部，以免擦伤包被物使抗体(抗原)脱落而影响实验结果的准确性;
3、洗涤不充分，会使结果假性增高，过分洗涤呈假阴性;
4、比色时应保持包被孔底部无异物、无水汽，特别是冬季板从37℃水浴箱取出时，底部留有水汽，应将板底擦干后进行比色，水汽或孔内气泡也会使OD值升高;
5、抗原与抗体反应达到完全平衡，依赖于温度与时间。温度45℃易引起失活及标记物脱落，温度低于4℃，影响反应速度。

Elisa试剂盒咨询订购方式：
1.可来电向我们直接咨询及订购。
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4.可通过邮件咨询及订购。
【测试种属】犬、大小鼠、人、豚鼠、兔子、牛羊、猪、鸡鸭elisa试剂盒等种属
【储存方式】：2-8℃
【检测目的】用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
【用途】科研实验，不用于临床诊断。
操作步骤

　　1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。

　　200ng/L

　　5 号标准品

　　150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液

　　100ng/L

　　4 号标准品

　　150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

　　50ng/L

　　3 号标准品

　　150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

　　25ng/L

　　2 号标准品

　　150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

　　12.5ng/L

　　1 号标准品

　　150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

　　2. 加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

　　3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

　　4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

　　5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。

　　6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。

　　7. 温育：操作同 3。

　　8. 洗涤：操作同 5。

　　9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

　　10 分钟.

　　10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

　　11. 测定：以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
样本的收集：

　　1、血清：用无菌管收集，室温血液自然凝固 10-20 分钟，2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)，仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

　　2、血浆：应根据标本的要求选择 EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)，仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

　　3、尿液：用无菌管收集，2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　4、胸腹水：用无菌管收集，2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)，仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　5、脑脊液：用无菌管收集，2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)，仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　6、唾液：用无菌管收集，2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)，仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　7、细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)，仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　8、牛奶：用无菌管收集，2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)，仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　9、蜂蜜：用无菌管收集，2-8℃条件离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)，仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　10、全血：用含有抗凝剂的无菌管收集，立即轻轻摇动，来回轻轻颠倒数次，使血液和抗凝剂混匀，以防血液凝固。