小鼠HMGB1试剂盒_小鼠HMGB1ELISA试剂盒

小鼠HMGB1试剂盒由上海通蔚生物整理，包括小鼠HMGB1ELISA试剂盒使用说明书、储存及有效期、小鼠HMGB1试剂盒使用注意事项及操作步骤等。

小鼠HMGB1ELISA试剂盒(48T)组成：

1、小鼠HMGB1抗体预包被板/4孔×12条

2、样准品 / 0.3ml*6管

3、小鼠HMGB1标本稀释液/3ml

4、检测抗体－HRP/5ml

5、洗涤液(20X)/15ml

6、底物A/3ml

7、底物B/3ml

8、终止液/3ml

9、封板膜/2张

10、自封袋/2张

11、说明书/1份

小鼠HMGB1ELISA试剂盒储存及有效期：

未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存，6个月内有效。请注意，收到试剂盒后请尽快将TMB洗涤液，终止液保存于4℃，其他试剂保存于-20℃。

使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮湿。

小鼠HMGB1ELISA试剂盒注意事项及操作步骤：

注意事项：

1、由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。

2、洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。

3、为标准品的性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。

4、TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。

5、加样时，请注意每个样品或标准品更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。

6、由于本ELISA试剂盒均经过立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。

7、充分混匀对反应结果的性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以混匀。

8、本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致终检测到的吸光度显著下降。

9、洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使度下降并导致结果误差较大。

10、检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。

11、加样过程中须避免气泡的产生。

12、本产品于科研人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得存放于普通住宅内。

13、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤：

1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。

4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5．每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育5分钟。避免光照。

8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9．在450nm波长处测定各孔的OD值。