麦胚凝集素/凝集蛋白本生试剂盒

影响ELISA试剂盒实验的因素
一、试剂盒
1、抗原、抗体活性对效价的影响：主要是试剂中抗体(或抗原)的效价降低或失活，结果不易判断。再有ELISA法灵敏度高，对杂质的反应灵敏度也高，实验中空白对照OD值偏高或假阳性;
2、酶结合物浓度过高，也会导致OD值假性增高。
二、试验仪器
1、ELISA试剂盒加样器是否经过校正，酶免测定血清用血量很少，如手工加样器的性能不好，吸取样品不，会使结果忽高忽低;
2、每次洗板前，应检查洗板机针孔有无堵塞。
三、操作
1、检测前先将试剂盒从冰箱取出置室温平衡20min后使用，试剂用完及时放回冰箱冷藏，以免造成试验结果假性降低;
2、加样时注意勿触及包被板底部，以免擦伤包被物使抗体(抗原)脱落而影响实验结果的准确性;
3、洗涤不充分，会使结果假性增高，过分洗涤呈假阴性;
4、比色时应保持包被孔底部无异物、无水汽，特别是冬季板从37℃水浴箱取出时，底部留有水汽，应将板底擦干后进行比色，水汽或孔内气泡也会使OD值升高;
5、抗原与抗体反应达到完全平衡，依赖于温度与时间。温度45℃易引起失活及标记物脱落，温度低于4℃，影响反应速度。

区分ELISA试剂盒的方法：
一：选定一个检测范围内的浓度做多孔重复，可看出平行性好不好。即板内CV值的大小，此操作时需求当心加样的性。对一些制造较粗糙的试剂盒来说，板间CV值是较大的。
二：可选用已知浓度的重组细胞因子，稀释到检测范围内作为样本参加，看检测的性。
三：对用待测目标的重组细胞因子做试剂盒说明书上标定的小浓度稀释，可测出灵敏度，主张5个复孔以上才有含义。一般厂家以20个复孔做出的成果作为检测限。用此实验可验证出所购试剂盒的灵敏度是否如说明书所述，也可判别出所购试剂盒是否有夸张之说。
四：如果有相同目标的试剂盒，可用对方的标准品作为样本，分别参加各自的试剂盒做检测，以检测试剂盒的真实性，性。如其中一种是的，比较牢靠的话，可作为标准来验证另一试剂盒的程度。

ELISA试剂盒的特点：
1、采用全进口原料和抗体-、灵敏、特异，严格运用国际生产标准进行 批量生产;
2、规范包被操作-吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高;
3、的优化方案-重复性高，可靠性强;
4、购买本公司的ELISA试剂盒，免费代测;
5.产品现货充足，发货及时;
6、技术服务：，及时，耐心;
7、适用于血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本;
8、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡 、虾、鱼等;
9、可检测指标：炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长 因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等;
10、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，BUNSEN本生的科研队伍，的实验设备 、准确可靠的实验结果，是您实验合作;

Elisa试剂盒咨询订购方式：
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【测试种属】犬、大小鼠、人、豚鼠、兔子、牛羊、猪、鸡鸭elisa试剂盒等种属
【储存方式】：2-8℃
【检测目的】用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
【用途】科研实验，不用于临床诊断。
酶联吸附测定原理
ELISA遵守以下3个核心原理：1)抗原或抗体能吸附于固相载体表面，并保持其学活性;2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其学和酶学活性;3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，可根据已知浓度的抗原或抗体的颜色反应的深浅绘制标准曲线并依此计算出未知样品中抗体或抗原的浓度。在ELISA中酶起到很关键的作用，常用于ELISA法的酶有辣根过氧化物酶，碱性磷酸酯酶等，其中尤以辣根过氧化物酶为多。酶结合物是酶与抗体或抗原, 半抗原在交联剂作用下联结的产物,它不仅具有抗体抗原特异的反应，还能催化酶促反应，显示出生物放大作用。
Elisa试剂盒有几种检测方法：
双抗体夹心法
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。
2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+"、“-"号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
间接法
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜;
2.次日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分钟，洗涤;
6.’后一遍用DDW洗涤。
其余步骤同“双抗体夹心法"的4、5、6。