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谷酰胺含量试剂盒,谷酰胺检测试剂盒 |
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谷酰胺含量试剂盒
测定意义：
GS（EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物体内氨同化的关键酶之一，催化铵离子和谷酸合成谷酰胺，不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性，而且谷酰胺也是氨的主要储存和运输形式。
测定原理：
GS在ATP和Mg2+存在下，催化铵离子和谷酸合成谷酰胺；谷酰胺进一步转化为γ─谷酰基异羟肟酸，在酸性条件下与铁形成的络合物在540nm处有大吸收峰，可用分光光度计测定。
所需的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
注 意：
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
样本测定的准备：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
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