GST标签蛋白纯化磁珠

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★ BioMag-SA GST标签蛋白纯化磁珠(无锡百迈格生物）
一、概述：
百迈格生物GST融合蛋白纯化磁珠（1μm/2.8μm）是专为、快速纯化谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白而设计的， 把含有GST 标签的融合蛋白添加到GST磁珠中，在经过短暂的孵育后，重组蛋白质将被吸附到GST磁珠上。接下来可以使用磁珠分离架把融合蛋白洗脱下来。磁分离技术消除了微管的变化、大简化纯化工艺和提高纯化效率，减少目的蛋白损失，适合科研和工业领域便捷地进行GST融合蛋白的纯化。
该产品为粒径更小的1μm/2.8μm磁珠，亲水高分子聚合物，比传统的琼脂糖或者二氧化硅具有很好的分散性能，更低的非特异性结合，可多次重复使用。
二、产品规格：
配体
GSH谷胱甘肽
货号
BMGST1000-2（1μm）/BMGST2800-2（2.8μm）
磁珠基质
超顺磁亲水高分子磁珠
粒径大小
1μm/2.8μm（其他粒径可供选择）
包装
1ml
浓度
10mg/ml
结合量（每克磁珠）
﹥50mgGST融合蛋白
建议pH使用范围
1-10
沉降系数
3-6s
建议单次使用量
0.3-0.5mg
批次稳定性
<5%
保存
2-8℃，禁止冷冻，使用前请充分混匀
电镜图

三、通用使用方法
上样Buffer/结合洗涤液 Buffer: 1x PBSpH= 7.4。
10mM Na2HPO4，1.8mM KH2PO4，140mM NaCl，2.7mM KCl，调节pH值至7.4。
洗脱Buffer: 10mM GSH（还原型谷胱甘肽）,50mM Tris pH 8.0。
10mM Glutathione（还原型），50mM Tris-HCl，调节pH值至8.0。因Glutathione易氧化，需现用现配。
1 细胞破碎液准备
按每克湿重菌体/2~5ml上样Buffer的比例充分悬浮离心收集的菌体；600w功率，每循环超声3s，冷却3s，循环99×3次,破碎菌体；4℃、15000rpm离心15m，收集上清液，或用0.45μm滤膜过滤。(也可以使用其他方法进行细胞破碎，以达到让GST融合蛋白释放出来的目的）
2 使用前准备
2.1.充分摇匀磁珠。
2.2.取 100μl 磁珠到一个干净的管中。
2.3.把管放置在磁力架上收集磁珠，去上清液。
2.4.加入 1ml 上样 Buffer 充分混匀后，放置在磁力架上收集磁珠，去上清液。重复该次步骤 2 次。
3 融合蛋白结合及洗涤
3.1.用 100μl 的上样 Buffer 重新悬浮磁珠。
3.2.加入含有 GST 标签重组蛋白的样品轻轻混匀。
3.3.放置在振荡器或摇床中在室温下孵育 30-60min（如果重组蛋白在室温下不稳定，可以在 4℃进行）。
3.4.把孵育后的小管放置在磁力架上收集磁珠，去上清液。如果有需要可保留上清，另作检测。
3.5.加入 1ml 上样 Buffer 充分混匀后，放置在磁力架上收集磁珠，去上清液。重复该次步骤至少 3 次。
4 目的蛋白洗脱
4.1.加入 100μl 洗脱 Buffer 重新悬浮磁珠，放置在振荡器上室温震荡 5min
4.2.使用磁力架收集磁珠，把上清转移到另一个干净的管中。
4.3.重复步骤 1 和步骤 2.